Особенности блокирования мембранных молекул HLA-DR и HLA-G фракцией иммуноглобулина G человека, полученной из плазмы крови многорожавших женщин

Цель. Получить очищенный иммуноглобулиновый препарат из крови многорожавших женщин и оценить его функциональную активность в отношении молекул HLA-DR и HLA-G.

Материалы и методы. Для получения очищенного иммуноглобулинового препарата из крови многорожавших женщин была выполнена аффинная хроматография при помощи системы DEAE Affi-Gel Blue (BioRad, USA). Чистота выделенного препарата была оценена в иммуноэлектрофорезе. Оценка функциональной активности иммуноглобулинового препарата в отношении молекул HLA-DR и HLA-G была выполнена на лимфоцитах, полученных из периферической крови 14 условно-здоровых мужчин репродуктивного возраста. Для этого использовали проточную цитофлуориметрию.

Результаты. Было получено 30 мл иммуноглобулиновой фракции с концентрацией белка 4,3 г/л и остаточным альбумином менее 0,1 г/л (Architect C8000, Abbott, USA). Концентрация белка в полученной фракции соответствовала нижней границе концентрации иммуноглобулина G в сыворотке крови человека. Иммуноэлектрофорез показал, что в хроматографическом смыве имеется только фракция IgG. Оценка функциональной активности фракции IgG показала, что под ее воздействием подавлялась экспрессия HLA-DR и HLA-G на донорских лимфоцитах. Это изменение видимой экспрессии могло быть результатом блокирования мембранных молекул HLA-DR и HLA-G антителами, входящими в состав IgG многорожавших женщин.

Заключение. Очищенная фракция иммуноглобулина G многорожавших женщин может оказать значимый иммунопрофилактический и лечебный эффект в отношении иммунных нарушений в системе «мать-эмбрион» и, через этот эффект, подавлять формирование спорадических несиндромальных врожденных пороков сердца. Данный эффект обусловлен наличием в иммуноглобулиновой фракции антител, блокирующих молекулы HLA-DR и HLA-G на лимфоцитах.

1. Wu QY. [To promote the sustainable development of surgical treatment for congenital heart disease by innovation and practice]. Zhonghua Wai Ke Za Zhi. 2018;56(6):407-409. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.0529-5815.2018.06.003

2. Нагорнева С.В., Прохорова В.С., Шелаева Е.В., Худовекова А.М. Анализ частоты выявления врожденных пороков развития у плодов за последние 5 лет (2013–2017). Журнал акушерства и женских болезней. 2018;67(3):44-48 https://doi.org/10.17816/ JOWD67344-48

3. Шабалдин А.В., Шмулевич С.А., Чистякова Г.Н., Ремизова И.И., Лукоянычева Е.Б., Горшкова С.В., Шабалдина Е.В. Особенности аллогенных взаимодействий в краткосрочной культуре лимфоцитов супругов, имеющих детей с врожденными пороками сердца или ранние репродуктивные потери. Медицинская иммунология. 2019;21(2):279- 292 https://doi. org/10.15789/1563-0625-2019-2-279-292

4. Романенко Н.А., Бессмельцев С.С., Чечёткин А.В. Коррекция иммунного статуса пациентов иммуноглобулином человека для внутривенного введения. Казанский медицинский журнал. 2017;5:775-783 https://doi. org/10.17750/KMJ2017-775

5. Nyborg KM, Kolte AM, Larsen EC, Christiansen OB. Immunomodulatory treatment with intravenous immunoglobulin and prednisone in patients with recurrent miscarriage and implantation failure after in vitro fertilization/intracytoplasmic sperm injection. Fertil Steril. 2014;102(6):1650-1655.e1. https://doi.org/10.1016/j. fertnstert.2014.08.029

6. Дубоссарская З.М., Дубоссарская Ю.А. Основные вопросы иммунологии репродукции. Медицинские аспекты здоровья женщины. 2010;4(31):15-21

7. Böyum A. Separation of leukocytes from blood and bone marrow. Introduction. Scand J Clin Lab Invest Suppl. 1968;97:7.

8. Шабалдин А.В., Горшкова С.В., Шмулевич С.А., Цепокина А.В., Вавин Г.В., Лукоянычева Е.Б., Шабалдина Е.В. Способ прегравидарного прогнозирования риска формирования спорадических септальных врожденных пороков сердца без хромосомных заболеваний в последующих поколениях. Патент на изобретение RU 2709610 C1, 19.12.2019. Ссылка активна на 22.11.2020