Цель. Комплексная оценка действия активных форм кислорода и оксида азота на фрагмент рубцовой ткани ex vivo.

Материалы и методы. Исследование проводилось с использованием фрагментов рубцовой ткани (n=10), удаленных интраоперационно у пациентов с контрактурой Дюпюитрена. Каждый фрагмент был разделен на три равные части. Первая часть не подвергалась никаким манипуляциям, вторая была обработана синглетным кислородом, третья часть − оксидом азота (20 ppm). Продолжительность периода обработки тканей составляла 5 минут для всех факторов. По завершении эксперимента во всех образцах методом ближнепольного резонансного СВЧ-зондирования была проведена оценка диэлектрических свойств ткани с использованием программного комплекса, разработанного в Институте прикладной физики Российской академии наук. Далее каждую порцию ткани гомогенизировали с помощью аппарата "Ultraturrax" в соответствии со стандартной процедурой. Параметры окислительного метаболизма (интенсивность свободнорадикального окисления и общая антиоксидантная активность) изучали в полученных гомогенатах методом Fe-индуцированной биохемилюминесценции.

Результаты. Установлено, что обработка фрагментов рубцовой ткани потоком газа от генераторов синглетного кислорода и оксида азота приводит к изменению диэлектрических свойств ткани и интенсивности свободнорадикальных процессов в ней, а характер реакции специфичен для влияющего фактора. Показано, что особенностью действия синглетного кислорода является умеренное повышение диэлектрической проницаемости ткани и сбалансированное стимулирующее действие на про- и антиоксидантные системы. Эффект NO при концентрации 20 ppm связан с заметным увеличением диэлектрической проницаемости и проводимости, а также значительным увеличением антиоксидантного потенциала ткани.

Цель. Изучить корреляцию сывороточного персефина с клиническими, инструментальными и биохимическими признаками поражения головного мозга и неблагоприятным исходом у новорожденных в критическом состоянии.

Материалы и методы. В исследование включили 44 новорожденных в критическом состоянии, у которых в 1-е и 7-е сутки жизни была забрана кровь на персефин. У новорожденных регистрировались признаки острого церебрального повреждения: оценка по шкале Апгар, депрессия сознания, стволовых рефлексов у неседатированных пациентов на протяжении 7 дней жизни, судорожный синдром, нейросонографические признаки отека мозга, уровень сывороточного протеина S100B в возрасте 1 и 7 суток жизни, а также показатели неблагоприятного неврологического исхода. Изучалась корреляция концентрации сывороточного персефина 1 и 7 суток жизни с признаками повреждения головного мозга с использованием критериев Спирмена и Манн-Уитни.

Результаты. Не выявлено корреляции концентрации сывороточного персефина 1 и 7 суток с оценкой по шкале Апгар (р=0,721 и 0,222, соответственно), депрессией сознания и стволовыми рефлексами (p<0,05), судорожным синдромом (р=0,673 и 0,432), отеком головного мозга (р=0,737 и 0,558), уровнем сывороточного протеина S100B 1 суток жизни (р=0,095 и 0,475) и 7 суток жизни (р=0,988 и р=0,775). Также не выявлено корреляции уровня персефина 1 суток с неблагоприятным исходом (р=0,294). Выявлена корреляция персефина 7 суток с неблагоприятным исходом (р=0,013), с точкой отсечения на уровне 828 нг/мл с чувствительностью 39% и специфичностью 100%.

Заключение. Персефин обладает слабой диагностической и прогностической значимостью в оценке тяжести поражения головного мозга у новорожденных в критическом состоянии. Полученные данные корреляции концентрации персефина 7 суток с неблагоприятным исходом сомнительны ввиду отсутствия данных его корреляции с признаками тяжелого поражения головного мозга.

Цель. Описание морфологического строения створок ксеноперикардиальных биопротезов (БП) клапанов сердца, извлеченных из митральной позиции при замене протеза по причине эндокардита.

Материалы и методы. Исследовано 7 эпоксиобработанных ксеноперикардиальных БП модели «ЮниЛайн» (ЗАО «Неокор», г. Кемерово), извлеченных из митральной позиции при повторных хирургических вмешательствах в связи с развитием позднего протезного эндокардита. Образцы фиксировали в забуференном параформальдегиде с постфиксацией в тетраоксиде осмия. После обезвоживания в спиртах возрастающей концентрации и ацетоне образцы заключали в эпоксидную смолу. После полимеризации смолы образцы шлифовали, а затем полировали до нужной глубины образца. Для повышения электронного контраста образцы обрабатывали спиртовым раствором уранилацетата в процессе обезвоживания и цитратом свинца по Рейнольдсу после полировки эпоксидных блоков. Образцы визуализировали посредством сканирующей электронной микроскопии в обратно-рассеянных электронах при ускоряющем напряжении 15 кВ.

Результаты. В изученных образцах створок БП отмечали деградацию и дезинтеграцию внеклеточного матрикса, что проявлялось в разрыхлении, фрагментации и снижении электронной плотности коллагеновых и эластиновых волокон. В структуре створок наблюдали появление клеток реципиента, среди которых идентифицировали макрофаги, гигантские клетки инородных тел, нейтрофилы, эндотелиальные клетки и гладкие миоциты. Наибольшее количество клеток находилось на поверхностях створок. Несмотря на сходство клеточного состава, локализация клеток на желудочковой и предсердной поверхностях была различной. В центральной части створок отмечали присутствие единичных клеток, преимущественно макрофагов.

Заключение. Развитие протезного эндокардита сопровождается миграцией клеток реципиента в структуру БП. Заселение клетками является следствием развития структурных нарушений поверхностей створок и приводит к дезинтеграции внеклеточного матрикса в центральной части створок.

Цель. Установить особенность динамики компонентов системного иммунитета при полиорганной недостаточности в раннем послеоперационном периоде протезирования у пациентов с инфекционным эндокардитом.

Материалы и методы. Обследовано 110 пациентов с инфекционным эндокардитом подострого течения (80 случаев поражения нативных тканей и 30 случаев деструкции биологического протеза клапана сердца). Концентрацию биологических маркеров в сыворотке крови определяли методом иммуноферментного анализа: наборами для in vitro количественного определения циркулирующих иммунных комплексов С3d и C1q, содержащих IgG, методом иммуноферментного анализа коммерческими наборами производителей - CIC–C3d (IBL, Нидерланды) и CIC-C1q (BUHLMANN, Швеция). Количественное определение С5а компонента комплемента проводили с использованием набора «HUMAN C5a EISA TEST KIT» (Hycult Biotech, Нидерланды) в соответствии с инструкцией производителя. Уровень С-реактивного белка (CRP) определяли набором «hsCRP ELISA» (Biomerica, США). Концентрации общих циркулирующих иммуноглобулинов классов A, M и G проводили с использованием наборов «IgA общий-ИФА-БЕСТ», «IgM общий-ИФА-БЕСТ» и «IgG общий-ИФА-БЕСТ» (АО «ВЕКТОР-БЕСТ», Россия) соответственно.

Результаты. Установлено, что пациенты старше 50 лет имеют системное воспаление в послеоперационном периоде протезирования клапанов сердца в 2 раза чаще по сравнению с более молодыми пациентами и в 3 раза чаще − полиорганную недостаточность как осложнение хирургического лечения клапанного порока. Выявлены особенности напряженности иммунного ответа у лиц пожилого возраста, ассоциированные с рисками развития полиорганной недостаточности в раннем послеоперационном периоде протезирования клапанов сердца: повышение концентраций компонента С3d и компонента С5а и низкое содержание IgМ и IgG. Концентрация IgМ ниже 9,50 мг/мл, IgG ниже 2,00 мг/мл увеличивает риск развития полиорганной недостаточности в три раза (3,07 (1,96-4,04), р=0,001).

Заключение. Данные исследования могут быть использованы для составления прогнозов при оценке риска развития осложнений у данной категории пациентов.

На сегодняшний день нет точных методов прогнозирования риска неблагоприятного течения хронической сердечной недостаточности (ХСН) у больных с инфарктом миокарда (ИМ) и сохранённой фракцией выброса (ФВ) левого желудочка (ЛЖ). Однако существует целый спектр показателей крови, изучение которых в качестве индикаторов фиброзирования миокарда и, в свою очередь, неблагоприятного течения ХСН, активно продолжается. Статья посвящена изучению С-концевого пропептида проколлагена I типа (PICP) и N-концевого пропептида проколлагена III типа (PIIINP) − наиболее перспективных маркеров ремоделирования миокарда и прогрессирования ХСН, в том числе при сохранной ФВ ЛЖ.

Цель. Изучение взаимосвязей маркеров фиброзирования PIIINP и PICP со структурно-функциональными характеристиками миокарда у пациентов с ИМпST и сохраненной ФВ ЛЖ.

Материал и методы. В исследование включены 83 больных (72,2% мужчин и 27,8% женщин) с инфарктом миокарда с подъемом сегмента ST (ИМпST) и сохранной ФВ ЛЖ (≥50% по Симпсону), средний возраст которых 58,8 года. В течение первых суток госпитализации всем пациентам определяли концентрации PICP и PIIINP методом иммуноферментного анализа лабораторными наборами BCM Diagnostics (США) и выполняли расчет отношения PI/PIII. Для сравнения полученных значений изучаемых маркеров сформирована контрольная группа здоровых добровольцев (n=20), сопоставимая по возрасту и полу с изучаемой выборкой пациентов.

Результаты. Значения маркеров у пациентов с ИМ с подъемом сегмента ST составили: PICP – 609,0 (583,0;635,0) нг/мл (р=0,047) (выше значений группы контроля в 3,4 раза); PIIINP - 26,0 (18,9;34,9) нг/мл (р=0,049), что выше значений группы контроля в 3,6 раза.

Заключение. В выборке пациентов с ИМ и сохраненной сократительной способностью миокарда в первые сутки заболевания выявлено значительное превышение концентраций PIIINP (в 3,6 раз) и PICP (в 3,4 раза) относительно значений контрольной группы. Установлена отрицательная корреляционная связь между PICP и скоростью движения фиброзного кольца митрального клапана. Поиск показателей, характеризующих усугубление диастолической дисфункции пациентов с ХСН и сохранной ФВ после острого коронарного синдрома, должен быть продолжен с целью своевременной коррекции лечения, предотвращения декомпенсации недостаточности и, в последующем, летальных исходов.

Цель. Провести анализ критических акушерских состояний (КАС) в Забайкальском крае в год пандемии COVID-19 2020 года в сравнении с доэпидемическим периодом 2019 года.

Материалы и методы. Дизайн − ретроспективный анализ. Объекты исследования: первичная медицинская документация 34 пациенток категории «near miss» (NM) и 3 случаев материнской смертности (МС) за 2020 год; 22 случаев NM и 3 случаев МС за 2019 год.

Результаты. Коэффициент жизнеугрожающих состояний (КЖУС, (NM+MC) на 1000 живорожденных) возрос с 2,0 в доэпидемическом периоде до 3,0 в год пандемии COVID-19. В 2019 г. структура МС представлена только акушерскими причинами; в 2020 году − только экстрагенитальной патологией: 66,7% − сосудистыми заболеваниями; 33,3% − COVID-19. Лидирующими причинами «near miss» в 2019 и 2020 гг. явились акушерские кровотечения, вызванные преимущественно отслойкой плаценты, и тяжелая преэклампсия. Позитивными тенденциями являются и увеличение индекса выживаемости (соотношение NM:МС) с 7,3:1 до 11,3:1, и снижение индекса смертности (MC/ (NM + MC) × 100) с 12,0% до 8,1%.

Заключение. Анализ структуры и причин случаев КАС позволяет оценить систему организационных и лечебных мероприятий в действии, выявить региональные проблемы службы родовспоможения, возникшие в период пандемии COVID-19, и изыскать дополнительные ресурсы для снижения материнской заболеваемости и смертности в условиях сохраняющейся опасности распространения новой коронавирусной инфекции.

Цель. Разработка прогностической модели для расчета вероятности возникновения рецидива миомы матки после проведенной миомэктомии.

Материалы и методы. Объектом исследования являются 149 женщин в возрасте от 19 до 45 лет с миомой матки, которым была произведена миомэктомия. Прогнозирование миомы матки осуществлялось с помощью применения многомерных статистических методов обработки данных, в частности дерева классификации, в статистическом пакете с прикладной программой IBM SPSS Statistics. Для классификации пациенток на женщин с рецидивом ММ и женщин с отсутствием рецидива данного заболевания осуществлялось построение математической модели дерева классификации. Для построения дерева классификации в качестве входных признаков использовались 10 параметров пациентов. При этом 9 параметров представлены в бинарном виде, где 0 – отсутствие признака, 1 – наличие признака: наличие отягощенной наследственности, отсутствие родов, наличие операций на матке в анамнезе (миомэктомия), наличие ожирения, быстрый рост миоматозных узлов, наличие множественных узлов. Отдельно результаты иммуногистохимического исследования представлены в виде следующих параметров: маркер BCL-2 слабая, умеренно выраженная, интенсивная экспрессия; Ki-67 − слабая, умеренно выраженная, интенсивная экспрессия; VEGF слабая, умеренно выраженная, интенсивная экспрессия. Один параметр (возраст) представлен в количественном виде.

Результаты. При анализе полученного дерева классификации можно сделать вывод, что наиболее значимыми параметрами, оказывающими влияние на вероятность возникновения рецидива миомы матки, являются: паритет родов (чем ниже паритет родов, тем выше вероятность возникновения рецидива миомы матки), наличие множественных узлов удаленных во время миомэктомии, наличие интенсивной экспрессии маркера ангиогенеза VEGF, наличие слабой экспрессии маркера ингибитора апоптоза BCL-2.

Заключение. Применение данного метода в медицинской практике позволяет выделить наиболее значимые анамнестические факторы в прогнозировании рецидива миомы матки и является перспективным для дальнейшего изучения различных закономерностей с использованием дополнительных факторов.

Цель. Изучить риск заболевания COVID-19 и выявить клинико-эпидемиологические особенности в популяции больных туберкулезом.

Материалы и методы. В период с 13.03.2020 г. (дата появления первого пациента с COVID-19) по 31.12.2020 г. изучена заболеваемость COVID-19 и реализованный риск инфекции в различных группах населения Кемеровской области–Кузбасса. Группу наблюдения составили 3929 больных туберкулезом, из которых к окончанию исследования COVID-19 заболело 113 человек. В группе сравнения (лица, не болеющие на момент исследования туберкулезом) СОVID-19 заболело 25774 человек. Для изучения особенностей влияния туберкулеза на клиническое течение COVID-19 среди пациентов с коронавирусной инфекцией методом случайной выборки по принципу связанных пар и равной медианы возраста были сформированы группа наблюдения (I, больные COVID-19 и туберкулезом, n=71), группа сравнения (II, n=71), которую составили пациенты с COVID-19 без туберкулеза. При поступлении в инфекционное отделение всем пациентам проводились: определение РНК SARS-CoV-2, исследование общего анализа крови и мочи, биохимическое исследование крови, коагулограмма.

Результаты. Заболеваемость COVID-19 в популяции больных туберкулезом была в 2,96 раза выше, чем среди населения, не болеющего туберкулезом. (2876,05 о/ оооо и 971,17 о/ оооо соответственно). Выявлены различия в сравниваемых группах по возрасту: в группе больных туберкулезом самая высокая заболеваемость COVID-19 зарегистрирована у лиц 18−29 лет и 65 и старше. Гендерные различия между группами были значимы. В группе больных туберкулезом в 1,4 раза чаще болели мужчины, в группе сравнения в 1,3 раза чаще болели женщины. Заболевание COVID-19 у больных туберкулезом протекало преимущественно в легкой форме. Вирусная пневмония развивалась в 9,2 раза реже, оксигенотерапия потребовалась только в 1,41% случаев (16,9% в группе сравнения), необходимость в антибиотикотерапии была в 11,8 раза реже. В группе больных туберкулезом гипертермия, кашель и слабость встречались значительно реже. Большую роль, чем туберкулез, играли артериальная гипертензия, хроническая сердечная недостаточность, атеросклероз аорты и периферических артерий и ожирение, которые в группе сравнения встречались чаще. На этапе поступления в стационар в обеих группах были выражены метаболические нарушения. Нарушение почечного гомеостаза (снижение скорости клубочковой фильтрации, повышение молярной концентрации креатинина), нейтрофилия, лимфопения выявлены в группе сравнения. Параметр коагуляционного гомеостаза (фибриноген), уровень печеночных трансаминаз (аспартатаминотрансфераза) были выше в группе больных туберкулезом.

Заключение. Активный туберкулез является фактором, повышающим риск заболевания COVID-19 без влияния на тяжесть инфекционного процесса.

Цель. Комплексная оценка проявлений эпидемического процесса внебольничных пневмоний (ВП) микоплазменной этиологии в Приволжском федеральном округе и Нижегородской области.

Материалы и методы. В исследовании применялись эпидемиологические, микробиологические и статистические методы исследования. Ретроспективно проанализированы статистические отчетные формы и электронные базы данных за 2012−2019 гг. (443 случая микоплазменных пневмоний). Оперативный эпидемиологический анализ включал эпидемиологическое обследование очагов с групповой и вспышечной заболеваемостью (349 очагов и 4 крупные вспышки ВП). В 2020 году в рамках проспективного наблюдения оценена этиологическая структура ВП у госпитализированных пациентов всех возрастов с рентгенологически подтвержденной пневмонией (96 детей − от 1 месяца до 17 лет и 56 взрослых старше 18 лет). В 2021 году проведено микробиологическое исследование носительства ведущих этиологических патогенов в носоглотке среди здорового населения (325).

Результаты. Установлено, что среднемноголетняя заболеваемость микоплазменными пневмониями на территории Нижегородской области за 2012−2019 гг. составила 3,4 ⁰/₀₀₀₀ [95%ДИ 0,3-6,5] (р<0.001) с выраженной тенденцией к росту (темп среднегодового прироста 27%). По официальным данным, этиология ВП по Нижегородской области за 2019 г. была установлена в 25,81±0,7% среди всех зарегистрированных случаев, на долю Mycoplasma pneumoniae приходилось 8±0,43%, что составило 56,72±2,53% от всех этиологически расшифрованных ВП. По результатам проспективного наблюдения за детьми, госпитализированными в медицинские организации с диагнозом ВП, этиология была расшифрована у 93,1±2,5%, из них на долю Mycoplasma pneumoniae приходится 13,8±3,5% (что составило 14,6±3,74% из всех ВП). Mycoplasma pneumoniae также была выявлена в ассоциации с Streptococcus pneumoniae в 10,3±3,1% (что составило 11,23±3,34% из всех ВП). У взрослых пациентов Mycoplasma pneumoniae не была обнаружена. Определена крайне низкая распространенность носительства Mycoplasma pneumoniae среди взрослых и детей – 4 и 0,87 на 100 обследованных человек соответственно.

Заключение. Современная эпидемиологическая ситуация на территории Нижегородской области в отношении ВП характеризуется увеличением роли Mycoplasma pneumoniae в общей этиологической структуре ВП, выраженным ростом заболеваемости МП. На уровне округа отмечается низкая выявляемость МП по субъектам и территориальная неравномерность распределения заболеваемости.

Цель. Анализ геновидового состава боррелий в иксодовых клещах различных видов в природных очагах иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ) юга Западной Сибири.

Материал и методы. Выполнен обзор исследований, посвященных изучению геновидового состава боррелий в иксодовых клещах различных видов в природных очагах ИКБ юга Западной Сибири, бактериологическим (посев на питательную среду BSK-H (SIGMA, США) и молекулярно-генетическим (ПЦР в режиме реального времени) методами, генотипированных путем секвенирования (1148 экземпляров иксодовых клещей, собранных с растительности, и 2183 экземпляров клещей, снятых с людей).

Результаты. Инфицированность клещей боррелиями варьировала от 22,4% в Республике Алтай до 56,9% в Новосибирской области. Существенных различий в уровнях инфицированности боррелиями клещей I. persulcatus и I. pavlovskiy не установлено (средние уровни зараженности 40,0% и 38,8% соответственно). Изучение геновидового состава боррелий, циркулирующих в природных очагах Западной Сибири, показало наличие, как минимум, пяти геновидов патогенных боррелий (B. garinii, B. afzelii, B. bavariensis, B. miyamotoi и B. spielmanii). В базу данных GenBank депонировано 45 нуклеотидных последовательностей межгенного спейсера rrf (5S)-rrl (23S). Частота выявления геновидов B. garinii и B. afzelii у клещей различных видов (I. persulcatus и I. pavlovskiy) не имеет значимых отличий. Отмечена более частая встречаемость B. garinii по сравнению с B. afzelii. Уровни инфицированности клещей I. persulcatus боррелиями B. miyamotoi существенно ниже (в 3,5 раза), чем геновидами B. garinii и B. afzelii. В клещах D. reticulatus выявлена ДНК B. spielmanii и B. miyamotoi. Заключение. Необходимо продолжение исследований по оценке роли луговых клещей D. reticulatus в циркуляции боррелий различных геновидов в природных очагах на территории Российской Федерации.

Диапазон применения молекулярно-генетических методов при диагностике и терапии заболеваний человека чрезвычайно широк. Это определяется тем объемом наследственной информации, которая содержится в человеческом геноме. Исследование ДНК человека позволяет не только установить наследственные факторы предрасположенности к заболеваниям, но и выявлять генетические отклонения в процессе индивидуального развития и проводить мониторинг этих изменений в случае предполагаемого патологического исхода. Генодиагностика позволяет также изучить индивидуальные генетические особенности пациента для прогнозирования реакций на тот или иной вид лечения для достижения максимального терапевтического эффекта. Основным способом изучения генома человека в медицинской практике является ПЦР-диагностика. Простота, низкая себестоимость, высокая чувствительность и надежность метода наряду с уникальными данными, получаемыми при анализе, позволили ПЦР-диагностике стать рутинным диагностическим методом в различных медицинских направлениях. В лекции рассматриваются некоторые технологические нюансы ПЦР-диагностики при изучении генетического полиморфизма человека. Описываются реальные лабораторные методы и примеры выявления генных и хромосомных мутаций с патологическим эффектом. Обсуждаются перспективы использования количественного анализа нуклеиновых кислот человека в медицинской практике. Особое внимание уделяется вопросам фармакогенетики как перспективного медицинского направления для внедрения персонифицированного подхода к терапии. Лекция ориентирована на студентов медико-биологических специальностей, а также на молодых специалистов, планирующих использовать в своей практической деятельности молекулярно-генетические методы исследований. Для лучшего понимания обсуждаемых вопросов рекомендуется ознакомление с предыдущими лекциями данного цикла.

Персистирующая полиорганная недостаточность – новый фенотип критического пациента, способный нивелировать все первичные успехи по лечению пациента в отделении реанимации, что связано с увеличением потребности в методах замещения функции органов, развитием отдаленных последствий в виде когнитивного дефицита, мышечной слабости и полинейропатии критических состояний. Приводится случай из практики, демонстрирующий эффективность первичного реанимационного лечения пациента с тяжелой политравмой с дальнейшей персистенцией полиорганной недостаточности и потребностью в длительной терапии, направленной на восстановление критического пациента и акцентом на препараты, воздействующие на когнитивную функцию.